?尿素氮（BUN）含量測定試劑盒（二乙酰肟顯色法）

貨號：ZK-PL4011

規(guī)格：100-300次

描述：尿素是體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝的含氮終產(chǎn)物，構(gòu)成了血液中絕大部分的非蛋白氮。尿素產(chǎn)生于肝臟， 經(jīng)腎臟排泄至尿中，其含量取決于蛋白質(zhì)攝入量，蛋白質(zhì)分解代謝和腎功能。血清（漿）中尿素測定是臨床中反映腎小球?yàn)V過功能的常用指標(biāo)。試劑盒采用二乙酰肟顯色法，操作簡單，特異性強(qiáng)，重復(fù)性佳，線性范圍 0.03-14mmol/L。

原理: 根據(jù) Fearon 反應(yīng)，在強(qiáng)酸性和加熱條件下，尿素與二乙酰一肟縮合生成紅色的二嗪衍生物，在540nm處有最大吸收峰，光密度值在一定范圍內(nèi)與尿素含量成正比。

適用：血清、血漿 、尿液

組成：（微孔測定 300 個樣本，1cm 比色杯 100 個樣本）

R1 試劑 50ml

R2 試劑 5ml

16mM 尿素標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml

以上組分 4℃保存， 12 個月有效

所需設(shè)備：酶標(biāo)儀、721、722 型可見光分光光度計(jì)。最佳工作波長 540nm，如無此波長建議選用 520nm。

操作步驟：

一、工作液配制：將 R1 試劑與 R2 試劑按 10:1 的比例混合均勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。

二、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：將 16mM 標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水倍比稀釋為 8、4、2、1、0.5、0.25、0.125mM 通常取 8、4、2、1、0.5mM 五個點(diǎn)即可，注意設(shè)置 0 濃度空白對照。

三、尿素濃度測定

（1） 參照下表加樣，充分混勻（可按比例調(diào)整整體上樣量）。

尿液樣本建議稀釋 1：10—1:50 倍，若超出線性范圍，需再稀釋。

（2） 請使用耐高溫管于 100°C 沸水浴或金屬浴中孵育 15min。立即冷水冷卻 5min。反應(yīng)平衡后，30min內(nèi)顏色穩(wěn)定。

（3） 使用酶標(biāo)儀或可見光分光光度計(jì)，540nm 空白管調(diào)零后，進(jìn)行測定。

（4） 以 OD 值為 y 軸，尿素濃度為 x 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算尿素濃度。

說明：

（1） 目前實(shí)驗(yàn)研究中，已基本采用直接測定尿素濃度反應(yīng)腎臟濾過功能，試劑盒測定的數(shù)值即為尿素濃度，單位為mmol/L。

（2） 正常血清尿素濃度參考值 2.86~8.20 mmol/L。

（3） 尿素氮是指尿素分子氨基中的N 含量（blood urea nitrogen, BUN），檢測結(jié)果多用 mg/dl 為單位，尿素和尿素氮換算公式：

尿素 mg/dl*0.1665=尿素 mmol/L

尿素 mg/dL *(28.02/60.60)=BUN mg/dL

（4） 試劑盒僅限于科研，操作時請佩戴手套。