?細(xì)菌總蛋白變性提取試劑

貨號(hào)：ZK-PL3512

描述：

細(xì)菌蛋白提取試劑Ⅱ(變性)采用離子型去污劑，用于提取細(xì)菌中總蛋白，適用于后續(xù)的Western Blot等免疫實(shí)驗(yàn)。

適用范圍：

從新鮮或者凍存的細(xì)菌中提取蛋白。

規(guī)格：

25ml 100mL

儲(chǔ)存：

室溫保存 12個(gè)月有效

提取方法：

1. 將細(xì)菌培養(yǎng)物在預(yù)先稱(chēng)重的離心管中4oC，5000g離心15分鐘，收集菌體；

2. 去上清，稱(chēng)量菌體重量，按照每克菌體加入10-50ml細(xì)菌蛋白抽提試劑Ⅱ（變性），渦旋震蕩使菌體完全重懸；

3. 室溫孵育15-20分鐘（孵育時(shí)間可根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型的不同做調(diào)整）。

4. 15000g，離心10分鐘；

5. 將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中，即得到總蛋白，可應(yīng)用BCA法進(jìn)行蛋白定量及后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

注意：

1. 該提取試劑中不含有蛋白酶抑制劑，用戶(hù)可根據(jù)具體情況添加蛋白酶抑制劑、還原劑、螯合劑等。

2. 當(dāng)提取物粘度較高或提取的蛋白以包涵體形式存在時(shí)，建議在加入溶菌酶和DNaseⅠ.

3. 如果在提取純化過(guò)表達(dá)蛋白的過(guò)程中，得到的部分蛋白可能在沉淀中，那么目的蛋白可能以包涵體的形式存在，可使用包涵體蛋白溶解液進(jìn)行溶液，也可以?xún)?yōu)化蛋白表達(dá)條件，增加可溶性蛋白的表達(dá)。