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?骨蛋白提取試劑
貨號:ZK-PL3508
描述:
骨組織蛋白提取試劑能充分裂解骨細胞,成骨細胞、破骨細胞,提取的蛋白可用于Western Blot蛋白質電泳等下游蛋白研究。
儲存:
4℃保存 12個月有效
規(guī)格:
50ml 100ml
操作步驟:
1. 取新鮮骨組織樣品,在預冷的生理鹽水中充分浸泡(換液一次),然后用蒸餾水清洗,去除血液,紅細胞。注意:請先剔除骨外膜(含量較少,可省略次步驟)。
2. 將骨組織剪碎,稱重后放入裝有液氮的研缽中,磨成粉末,保持液氮不能完全揮發(fā)。(如不方便液氮研磨也可直接加入提取液后研磨)。
3. 將骨組織粉末加入離心管中,每100mg骨組織加入200ul-300ul蛋白提取試劑。
4. 混勻后冰浴30分鐘。每隔5分鐘在漩渦混合儀上振蕩20秒。
5. 4℃,12000rpm條件下離心15分鐘。
6. 將上清轉移到新的離心管中,即得到骨組織總蛋白。
7. 上述蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
說明:
1.在轉移上清液時不要吸入底部的沉淀物;
2.實驗過程中的所有試劑建議-20℃冰箱預冷。整個過程最好保持樣品處于低溫狀態(tài)。
3.在該裂解緩沖液中未加入蛋白酶抑制劑,用戶可自行選擇進行添加。
4.本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
5.避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
6.進行后續(xù)蛋白定量時,請使用lowry法蛋白定量,建議將蛋白提取液稀釋10倍后再進行定量。
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