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?飛克+皮克 ECL超敏發(fā)光液
貨號:ZK-PL4192?
規(guī)格:100ml?
描述:
ECL發(fā)光液可用于直接或間接檢測與辣根過氧化物酶HRP關聯(lián)的蛋白或核酸底物。普利萊是國內(nèi)最早推出ECL化學發(fā)光液的民族品牌,使用普利萊ECL化學發(fā)光產(chǎn)品發(fā)表的SCI論文文章影響因子超過5000分。經(jīng)過不斷研發(fā)升級,普利萊目前擁有中、強、極強全系列發(fā)光液,與國外進口品牌相比,品質(zhì)好,價格優(yōu),不論高豐度蛋白、低豐度蛋白,總有一款適合您!
用途:
適于全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng)和HRP標記探針的核酸雜交。
安全性:
無特殊毒性,按普通化學品處理。
使用方法:
1. 常規(guī)電泳、轉膜、HRP標記抗體或核酸探針孵育、洗膜。注意用HRP標記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。核酸雜交膜用HRP標記探針雜交,洗膜。
2. 洗滌膜上的HRP標記二抗時,配制新鮮發(fā)光工作液:分別取等體積的溶液A和B混合,放置使之升到室溫。建議立即使用工作液,室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈敏度略有降
低。
3. 用鑷子取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入并與發(fā)光工作液(0.125ml發(fā)光工作液/cm2膜)充分接觸。準備立即使用全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng)掃
描。孵育時間過長不會增加靈敏度,有時還會導致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應,使用過少的發(fā)光工作液不利于反應進行,也會導致膜上條帶曝光不均,明顯降
低靈敏度。為達節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。
4. 用鑷子夾起膜,搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。
5. 全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。
注意事項:
1. 步驟1-5可在日光燈下操作;但發(fā)光液曝露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 蛋白過量,將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關系。
3. 發(fā)光工作液孵育約1分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見,低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。如果曝光后條帶
不佳,可用洗膜緩沖液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL發(fā)光。
4. 由于不同發(fā)光液的靈敏度,選擇合適的抗體稀釋濃度,進行孵育!
5. 某些市售保鮮膜包裹印跡膜時會淬滅熒光,應選擇高質(zhì)量保鮮膜,例如“克林萊”牌子保鮮膜。
6. 暗室曝光時,使用肉眼可見的熒光-放射自顯影曝光標簽(#P2010)可幫助確定膠片上條帶的準確位置和大小。
7. NaN3能抑制HRP活性,回收第二抗體應避免使用NaN3,如必需使用勿超過0.01%。
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