?SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×,pH6.8)

產(chǎn)品貨號：ZK-L2209

產(chǎn)品規(guī)格：100ml　500ml

產(chǎn)品簡介：
本試劑為配制SDS-PAGE濃縮膠緩沖液，可用于配制各種濃度的變性及非變性PAGE凝膠，方便、快捷。產(chǎn)品中已加入10%SDS，使用時不用另外加入。
自備材料：
1、凝膠模具
2、Acr-Bis(30%,29:1)
3、10%APS(過硫酸銨)
4、TEMED
5、蒸餾水
操作步驟(僅供參考)：
根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適的PAGE分離膠配制濃度，膠濃度請參考附表1。
(一)灌制分離膠(各試劑使用量請參考附表2)
1、參照凝膠模具說明書，裝配好凝膠模具。(注：加入上層篩板有助于加樣時保持填料與樣品均勻接觸，是否加入上層篩板可根據(jù)實(shí)際情況選擇。)
2、將不同體積的Acr-Bis(30%,29:1)、分離膠緩沖液和蒸餾水在小燒杯或試管中混合。
3、加入10%APS和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產(chǎn)生氣泡。
4、在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液(對于mini-gel，凝膠液加至約距前玻璃板頂端
1.5 cm或距梳齒約0.5cm即可)，然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1～2cm的水層，
使凝膠表面保持平整。
6、靜置30～60min，待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個清晰的界面后，表面凝膠已聚合。
(二)灌制濃縮膠(各試劑使用量請參考附表3)
1、小心傾倒出覆蓋在分離膠上的水層。
2、將不同體積的Acr-Bis(30%,29:1)、濃縮膠緩沖液和蒸餾水在一個小燒杯或試管中混
合。
3、加入10%APS和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產(chǎn)生氣泡。
4、將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，直至凝膠溶液到達(dá)前玻璃板的頂端。
5、將梳子插入凝膠內(nèi)，避免產(chǎn)生氣泡。
6、靜置10~20min，等待濃縮膠聚合。
7、待凝膠聚合后，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔。
8、進(jìn)行常規(guī)電泳操作。

注意事項(xiàng)：
1、過硫酸銨配制成10%溶液后應(yīng)當(dāng)-20℃保存。應(yīng)盡量減少室溫存放時間以防失效。有效避免失效的方法是分成小份，-20℃保存，用2~3次，剩余的棄用，亦可4℃保存幾天。
2、TEMED易揮發(fā)，使用后請蓋緊瓶蓋。另外凝膠凝聚的速度和溫度及光照關(guān)系密切，可通過適當(dāng)調(diào)節(jié)TEMED的用量，控制在不同的室內(nèi)環(huán)境下凝膠凝聚的速度。
3、配制聚丙烯凝膠的過程中，如果室溫較低，可以置于37℃放置，加速凝固。
4、Acr-Bis(30%,29:1)有輕微神經(jīng)毒性，請小心操作。
5、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期： 3個月有效。??