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雙鏈DNA補(bǔ)平和連接試劑盒
貨號(hào):zk3108
英文名: Blunting & Ligation Kit
儲(chǔ)存: 冷凍(-20℃)
規(guī)格:10次 20次
概述
雙鏈 DNA 補(bǔ)平和連接試劑盒是利用大腸桿菌 DNA 多聚酶I 的 Klenow 片段多聚酶活性能夠補(bǔ)平不互補(bǔ)的 5’端突出為基礎(chǔ)。對(duì)于用2個(gè)不同限制性內(nèi)切酶酶切所獲得的片段,可以選擇性補(bǔ)平一端。再通過(guò) T4 DNA 連接酶對(duì)平末端 DNA 進(jìn)行有效連接,此試劑盒操作簡(jiǎn)便,全過(guò)程可在 1 h 內(nèi)完成。在連接緩沖液中加入 PEG 提高平末端 DNA 的連接效率。連接過(guò)程中載體 DNA 可自環(huán)化,片段會(huì)連成寡聚體。優(yōu)化插入片段和載體末端濃度和比率有利于提高正確連接產(chǎn)物的產(chǎn)率。
特點(diǎn)
操作簡(jiǎn)便,全過(guò)程可在1.5 h內(nèi)完成。
在連接緩沖液中加入PEG提高平末端DNA的連接速率。
應(yīng)用
連接、轉(zhuǎn)化
使用說(shuō)明
請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
組份
Klenow DNA Polymerase, 3 U/μl;10 × Klenow Reaction Buffer;0.5 mM dNTP Mix;T4 DNA Ligase, 2 U/μl;10 × Ligation Buffer;50% PEG 4000;Sterilized ddH2O;說(shuō)明書(shū)。
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