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T4 DNA 聚合酶
T4 DNA 聚合酶
T4 DNA 聚合酶

T4 DNA 聚合酶

 詳情說明

T4 DNA 聚合酶

貨號(hào):zk2110

英文名: T4 DNA Ligase
儲(chǔ)存: 冷凍(-20℃)

規(guī)格:1KU 200U 2.5KU

概述

T4 DNA連接酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5’ 磷酸基團(tuán)和3’ 羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。酶還可以修復(fù)雙鏈DNA,RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但是該酶對(duì)單鏈核酸無酶活性。T4 DNA連接酶需要輔因子ATP

應(yīng)用

粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RNA檢測(cè);位點(diǎn)特異性突變;擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性

使用說明

連接產(chǎn)物酶切前無需純化,可將限制酶直接加入連接反應(yīng)混合物中

組份

T4 DNA連接酶;10X T4 DNA連接酶 Buffer

技術(shù)規(guī)格

描述 T4 DNA連接酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5’ 磷酸基團(tuán)和3’ 羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。酶還可以修復(fù)雙鏈DNA,RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但是該酶對(duì)單鏈核酸無酶活性。T4 DNA連接酶需要輔因子ATP。
來源 含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
內(nèi)含物 T4DNA連接酶,10X T4 DNA連接酶 Buffer
分子量 55.3 kDa,單體
單位定義 在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37°C、20分鐘內(nèi)將1 nmol[32PPi]轉(zhuǎn)化為Norit可吸收形式所需要的酶量定義為1 U。
10X T4 DNA Ligase 緩沖液 400 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP(pH7.8, 25°C)
保存緩沖液 20 mM Tris-HCl(pH7.5), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50% (v/v) 甘油
用途 粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RNA檢測(cè);位點(diǎn)特異性突變;擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性。
抑制 當(dāng)反應(yīng)體系中NaCl或KCl的濃度超過200 mM時(shí),可強(qiáng)烈抑制T4 DNA 連接酶活性。
失活 65°C加熱10分鐘或者70°C加熱5分鐘。

     

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