中文名稱:ECL超敏發(fā)光液/ECL超敏發(fā)光底物
英文名稱:ECL Western Blotting Substrate
規(guī)格價(jià)格:
25ml 100ml
保存條件:Store at 2-8 °C for one year.
產(chǎn)品介紹:
ECL Plus 超敏發(fā)光液直接或間接檢測(cè)與辣根過(guò)氧化物酶HRP 關(guān)聯(lián)的蛋白或核酸底物。這一獨(dú)特的發(fā)光底物系統(tǒng)是目前最靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測(cè)試劑,具有極高靈敏度和高信噪比,可檢測(cè)出10-100 fg的微量抗原;發(fā)光迅速,熒光可使X 感光膠片感光達(dá)12小時(shí)以上,特別適用于痕量蛋白或核酸檢測(cè)。同時(shí)該試劑允許使用更高的抗體稀釋倍數(shù)(1:2000-1:10000),極其節(jié)省抗體。
試劑盒內(nèi)容:
25ml規(guī)格:A液12.5ml + B液12.5ml
100ml規(guī)格:A液50ml + B液50ml
保存方法: 2-8 oC避光保存,一年有效。
顯色步驟
1、執(zhí)行常規(guī)SDS-PAGE、轉(zhuǎn)膜和Western Blot封閉、一抗孵育、二抗孵育操作。
2、二抗適用HRP標(biāo)記二抗,適用恰當(dāng)?shù)南♂尡壤?br />
3、制備ECL工作液:A液和B液等體積的混合,例如1ml A液和1ml B液混合,混勻后即可使用。用量以充分覆蓋印跡膜為基準(zhǔn),每10 cm2膜需要大約1 ml工作液。
4、將印跡膜有蛋白的一面朝上平整的鋪在一張平板上,加上配好的發(fā)光底物工作液。
5、將將工作液均勻滴加在印跡膜上,孵育1-5min。可將一潔凈的保鮮膜或透明的玻璃紙平整的鋪在孵育有工作液的印跡膜上,輕輕趕出其間的氣泡。
6、在暗室中取一張X膠片小心置于膜上,曝光5秒至1分鐘,立即顯影定影。
7、根據(jù)其發(fā)光的強(qiáng)度,縮短或延長(zhǎng)X片的曝光時(shí)間(對(duì)微弱信號(hào),曝光時(shí)間可延長(zhǎng)至數(shù)小時(shí)),或者曝光一系列不同的時(shí)間后再顯影定影挑選一張滿意的。也可用合適的照相器材直接記錄蛋白膜的化學(xué)發(fā)光圖像。
安全性:
無(wú)特殊毒性,按普通化學(xué)品處理。如果不慎與眼、皮膚和衣物接觸,請(qǐng)立刻用大量清水沖洗。