測(cè)定意義：

輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD是糖酵解和TCA循環(huán)的主要?dú)涫荏w，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時(shí)，形成大量的ROS，同時(shí)NADH再生為NAD。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD比值說(shuō)明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過(guò)氧化狀態(tài)，NADH/NAD比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外，NAD降解產(chǎn)物具有非常重要的調(diào)控作用。

測(cè)定原理：

NAD和NADH在254 nm下有吸收峰，利用高效液相色譜法在相應(yīng)波長(zhǎng)下測(cè)定其含量。

需自備的儀器和用品：
高效液相色譜儀、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、針頭式過(guò)濾器（水系，50個(gè)，0.22μm）、濾膜（水系和有機(jī)系各2個(gè)，0.45μm）、C18柱（4.6 ×150 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個(gè)，2mL）、乙腈（120 mL）、甲醇（色譜級(jí)，300 mL）、蒸餾水