子科生物報道：西雅圖兒童研究所(Seattle Children 's Research Institute)的一個研究小組首次在人源化小鼠模型中證明，經(jīng)過改造的人類血漿B細(xì)胞可用于治療一種疾病——更具體地說，是白血病。這一結(jié)果標(biāo)志著工程漿細(xì)胞(ePCs)在治療癌癥、自身免疫性疾病和蛋白質(zhì)缺乏癥方面邁出了關(guān)鍵的一步。

西雅圖兒童研究所的Richard James博士說:“我們希望這項概念驗證研究是工程漿B細(xì)胞的許多應(yīng)用中的第一個，最終將導(dǎo)致單次治療。因為工程漿B細(xì)胞可以存活很長時間，超過10年，它們可以作為許多生物藥物的長期來源?！盝ames是該團隊發(fā)表在《分子療法》(Molecular Therapy)雜志上的論文的資深作者，題為“人類漿細(xì)胞工程分泌雙特異性驅(qū)動有效的體內(nèi)白血病殺傷”，他們在文中說，“這些發(fā)現(xiàn)支持了ePCs作為治療急性白血病和潛在其他癌癥的持久輸送系統(tǒng)的進一步發(fā)展?！?/p>

作者寫道，免疫療法，如雙特異性抗體，招募細(xì)胞毒性T細(xì)胞殺死癌細(xì)胞，有助于提高B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)患者的生存率。Blinatumomab是一種雙特異性抗體，已被批準(zhǔn)約十年，用于治療復(fù)發(fā)/難治性B-ALL患者。作者解釋說:“Blinatumomab是一種抗CD19 X抗CD3的非免疫球蛋白G樣雙特異性抗體(非igg樣雙特異性;也被稱為雙特異性T細(xì)胞結(jié)合劑)，2014年獲得美國食品和藥物管理局批準(zhǔn)，用于治療復(fù)發(fā)/難治性B-ALL患者?！比欢琤linatumumab治療的一個局限性是它需要持續(xù)的大劑量靜脈輸注來維持活性?！半p特異性非免疫球蛋白治療對患者的穩(wěn)定性構(gòu)成挑戰(zhàn)，需要3個療程的20天穩(wěn)態(tài)輸注，”James說。這種密集的治療方案給患者帶來了挑戰(zhàn)，因為頻繁更換包被證明是不方便的，并且使用端口增加了感染的風(fēng)險。作者進一步指出:“增強雙特異性抗體(如blinatumomab)的藥物遞送方法可以提高患者的依從性，增強治療效果?！?/p>

James和其他人的工作探索了利用工程漿細(xì)胞(ePCs)長期遞送蛋白質(zhì)藥物，研究小組繼續(xù)說。工程B細(xì)胞已經(jīng)在概念驗證研究中進行了研究，以提供生物藥物來治療蛋白質(zhì)缺乏癥、病毒感染和癌癥。由于這種細(xì)胞壽命長，分泌能力高，因此“非常適合長期輸送生物制劑”，研究小組繼續(xù)說道?！耙驗閜c和ePC的一個子集優(yōu)先定位于骨髓和其他B-ALL祖細(xì)胞所在的組織微環(huán)境，我們預(yù)測ePCs可以與局部雙特異性遞送協(xié)調(diào)，從而誘導(dǎo)有效的抗白血病活性。”

James補充說:“我們認(rèn)為，工程漿B細(xì)胞的第一個應(yīng)用將是生產(chǎn)患者難以使用的藥物。在這項研究中，我們希望證明工程B細(xì)胞療法的概念和功效。”

在他們報告的研究中，研究人員開發(fā)了一種基因編輯策略，用于生成ePCs，產(chǎn)生大量針對B-ALL或急性髓系白血病的雙特異性。他們寫道:“……我們描述了一種基于同源定向修復(fù)(HDR)的基因編輯策略，用于生成ePC，分別產(chǎn)生大量抗CD19  X抗CD3或抗CD33 X抗CD3非IGG樣雙特異性，以靶向B-ALL或急性髓性白血病(AML)?！彼麄兊膶嶒灲Y(jié)果表明，分泌雙特異性的ePCs可以促進T細(xì)胞驅(qū)動的人類原代細(xì)胞和人類白血病細(xì)胞系的殺傷。

“我們遇到的一個挑戰(zhàn)是，用于殺死腫瘤細(xì)胞的雙特異性抗體也可以結(jié)合工程漿B細(xì)胞，因為它們表達相同的靶蛋白，”James說?！盀榱丝朔@一挑戰(zhàn)，我們在制造工程細(xì)胞時刪除了抗體的靶蛋白CD19。令我們驚訝的是，CD19的缺失并沒有阻礙工程漿B細(xì)胞的制造?！?/p>

此外，研究人員發(fā)現(xiàn)，分泌抗CD19雙特異性抗體的漿細(xì)胞可以激發(fā)抗腫瘤活性，這一點在免疫缺陷小鼠的急性淋巴細(xì)胞白血病患者來源的異種移植物中得到了證實，這些移植物與自體T細(xì)胞共植入。

值得注意的是，在細(xì)胞遞送和腫瘤根除后一個月，血清中抗CD19雙特異性的穩(wěn)態(tài)濃度與連續(xù)輸注blinatumomab治療的患者相當(dāng)。研究人員指出:“在持續(xù)輸注blinatumumab的患者中，我們獲得了雙特異性的體內(nèi)血清濃度超過穩(wěn)態(tài)血漿濃度(CPss)。”

基于他們的研究結(jié)果，研究人員提出ePC策略可以增加急性白血病和其他治療半衰期有限或漿細(xì)胞局部遞送可以提高治療效果的疾病患者的雙特異性功能半衰期。結(jié)果還表明，雙特異性和其他生物制劑的長期臨床相關(guān)水平可以通過單次給藥來實現(xiàn)。作者說:“與其他雙特異性分泌細(xì)胞產(chǎn)物(包括巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞)相比，ePCs獲得的強大的雙特異性水平是有利的，它們在體內(nèi)轉(zhuǎn)移后在血清中沒有產(chǎn)生可檢測的水平?！?/p>

他們認(rèn)為，他們的發(fā)現(xiàn)支持進一步開發(fā)內(nèi)皮細(xì)胞，將其用作治療急性白血病和潛在的其他癌癥的持久輸送系統(tǒng)。James說:“我們創(chuàng)造了經(jīng)過改造的血漿B細(xì)胞，只需注射一次，就能在整個治療期間持續(xù)產(chǎn)生雙特異性抗體。這些細(xì)胞有效消除腫瘤的程度與臨床藥物相當(dāng)。關(guān)鍵的收獲是，經(jīng)過改造的漿B細(xì)胞可以在體內(nèi)長期生產(chǎn)藥物?！?/p>

研究小組承認(rèn)，如果在臨床上使用ePC雙特異性，應(yīng)該仔細(xì)評估幾種可能的毒性。在接受B細(xì)胞靶向治療的患者中，對正常的旁觀者B細(xì)胞持續(xù)的靶向、非腫瘤毒性是常見的?！按送?，對于B細(xì)胞惡性腫瘤的治療，可能很難設(shè)計患者自己的B細(xì)胞用于治療，因為存在一些B細(xì)胞癌變的風(fēng)險，”James評論道。“我們沒有測試是否可以使用不同人的B細(xì)胞來產(chǎn)生雙特異性抗體。使用這種同種異體產(chǎn)品的研究可能需要在這種特定療法用于治療B細(xì)胞癌之前完成?！?/p>

正如作者所指出的那樣，需要在人源化小鼠和非人靈長類動物中進行進一步的研究，以充分了解ePCs的活性、壽命和組織定位。在短期內(nèi)，他們計劃測試產(chǎn)生雙特異性抗體的工程血漿B細(xì)胞是否對其他B細(xì)胞介導(dǎo)的疾病有效，包括自身免疫。這些試驗最初將在動物模型中進行。此外，研究人員正在開發(fā)工程漿B細(xì)胞，以生產(chǎn)其他治療藥物，例如治療血友病等蛋白質(zhì)缺乏癥所需的藥物。他們正在探索工程B細(xì)胞的其他潛在應(yīng)用，包括修改其他免疫細(xì)胞來增強或抑制免疫系統(tǒng)。

在他們的論文中，作者總結(jié)道:“我們的研究結(jié)果表明，ePCs可能為蛋白質(zhì)療法的遞送提供益處，而不僅僅是這里所研究的雙特異性遞送……ePCs長期存在并產(chǎn)生強大水平的外源蛋白的潛力可能是解鎖受不良藥代動力學(xué)限制的生物制劑或治療肽的治療潛力的關(guān)鍵。”

“Human plasma cells engineered to secrete bispecifics drive effective in vivo leukemia killing”