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微生物所唐雙焱研究團(tuán)隊(duì)改造CRP全局轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白構(gòu)建高效生物合成底盤菌


子科生物報道:微生物研究所唐雙焱團(tuán)隊(duì)在Metabolic Engineering期刊發(fā)表文章,題為Designing glucose utilization "highway" for recombinant biosynthesis,構(gòu)建了由cAMP受體蛋白(即CRP)突變體調(diào)控的大腸桿菌底盤細(xì)胞,具有作為天然產(chǎn)物高效生物合成底盤宿主菌的潛力。 

  研究人員通過高通量篩選CRP突變文庫,獲得在重組表達(dá)中可賦予常用啟動子緩解 “葡萄糖抑制”的CRP突變體。轉(zhuǎn)錄組比較分析顯示,CRP突變體可重構(gòu)細(xì)胞代謝網(wǎng)絡(luò),提升三羧酸循環(huán),減少乙酸鹽累積,增加核苷酸生物合成,有效提高胞內(nèi)ATP合成,增強(qiáng)細(xì)菌耐受性和抗應(yīng)激活性。代謝產(chǎn)物分析進(jìn)一步證實(shí),糖酵解和乙醛酸三羧酸循環(huán)的上調(diào)增進(jìn)了細(xì)胞對葡萄糖的利用。研究者推測CRP突變體可激活糖酵解和三羧酸循環(huán),促進(jìn)葡萄糖的利用和生物合成。研究顯示,在受CRP突變體調(diào)控的大腸桿菌細(xì)胞中,天然產(chǎn)物香草醛、柚皮素和咖啡酸的生物合成皆有顯著提升。 

  微生物所唐雙焱研究組博士生張旋旋、曹玉峰和英盛(北京)生物技術(shù)有限公司劉瑩博士為該論文并列第一作者,微生物所唐雙焱研究員、梁朝寧副研究員,北京工商大學(xué)金建明教授和英盛公司史桂芝研究員為共同通訊作者。本項(xiàng)研究工作獲得了國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目和國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目的支持。 

 

 

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